色譜圖(chromatogram) 樣品流經(jīng)色譜柱和檢測器所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elution profile)。
基線(base line) 經(jīng)流動相沖洗,柱與流動相達到平衡后,檢測器測出一段時間的流出曲線,-般應平行于時間軸。
噪聲(noise) 基線信號的波動。通常因電源接觸不 良或瞬時過載、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。
漂移(drift) 基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起,柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產(chǎn)生漂移。
色譜峰(peak) 組分流經(jīng)檢測器時響應的連續(xù)信號產(chǎn)生的曲線。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對稱形正態(tài)分布曲線(高斯曲線)。不對稱色譜峰有兩種:前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。
標準偏差(standard deviation, σ) 正態(tài)分布曲線x=土1時(拐點)的峰寬之半。正常峰的拐點在峰高的0. 607倍處。標準偏差的大小說明組分在流出色譜柱過程中的分散程度。σ小, 分散程度小,極點濃度高,峰形瘦,柱效高;反之,σ大,峰形胖,柱效低。
峰底 基線上峰的起點至終點的距離。
峰高(peak height, h) 峰的zui高點至峰底的距離。
峰寬(peak width, W) 峰兩側拐 點處所作兩條切線與基線的兩個交點間的距離。
半峰寬(peak width at half-height, Wh/2) 峰高一半處的峰寬。
峰面積(peak area, A) 峰與峰底所包圍的面積。
死時間(dead time, t0) 不保留組分的保留時間, 即流動相(溶劑)通過色譜柱的時間。在反相HPLC中可用苯磺酸鈉來測定死時間。
死體積(deadvolume,V0) 由進樣器進樣口到檢測器流動池未被固定相所占據(jù)的空間。它包括4部分:進樣器至色譜柱管路體積、柱內(nèi)固定相顆粒間隙(被流動相占據(jù),Vm)、 柱出口管路體積、檢測器流動池體積。其中只有Vm參與色譜平衡過程,其他3部分只起峰擴展作用。為防止峰擴展,這3部分體積應盡量減小。
保留時間(retention time,tR ) 從進樣開始到某組分 在柱后出.現(xiàn)濃度極大值的時間。
保留體積(retention volume, VR) 從進樣開始到某組分 在柱后出現(xiàn)濃度極大值時流出溶劑的體積,又稱洗脫體積。
調(diào)整保留時間(adjusted retention time, t'R) 扣除死時間后的保留時間,也稱折合保留時間(reduced retention time)。 在實驗條件(溫度、固定相等) -定時,t'R 只決定于組分的性質(zhì),因此,t'R(或tR)可用于定性。
調(diào)整保留體積(adjusted retention volume, V'R ) 扣除死體積后的保留體積。
理論塔板數(shù)(theoretical plate number, N) 用于定量表示色譜.柱的分離效率(簡稱柱效),取決于固定相的種類、性質(zhì)(粒度、粒徑分布等)、填充狀況、柱長、流動相的種類和流速及測定柱效所用物質(zhì)的性質(zhì)。若用調(diào)整保留時間( t'R)計算理論塔板數(shù),所得值稱為有效理論塔板數(shù)(N有效或Neff)。
理論塔板高度(theoretical plate height, H) 每單位柱長的方差。實際應用時往往用柱長L和理論塔板數(shù)計算。
分配系數(shù)(distr ibution coefficient, K) 在一定溫度下,化合物在兩相間達到分配平衡時,在固定相與流動相中的濃度之比。
容量因子(capacity factor, k) 化合物在 兩相間達到分配平衡時,在固定相與流動相中的量之比。因此容量因子也稱質(zhì)量分配系數(shù)。
選擇性因子(selectivity factor, a) 相鄰兩組 分的分配系數(shù)或容量因子之比。從本質(zhì)上來說,a 的大小表示兩組分在兩相間的平衡分配熱力學性質(zhì)的差異,即分子間相互作用力的差異。
分離度(resolution, R) 相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值,也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5 稱為完全分離。